Kromosom adalah materi genetik yang merupakan kumpulan gen. Dalam Wikipedia (2009) kromosom merupakan struktur makromolekul besar yang memuat DNA yang membawa informasi genetik dalam sel.Untuk mengetahui bentuk, ukuran serta jumlah kromosom dapat dilakukan dengan pembuatan preparat kromosom. Morfologi kromosom akan dapat diamati dengan baik bila pembelahan selnya berada pada tahap metafase, karena pada saat itu kromosom berada dalam keadaan padat maksimum dan mudah menyerap pewarna sehingga mudah diamati.
Terdapat dua metode untuk pembuatan preparat kromosom, yaitu :
1. Metode langsung, melalui teknik jaringan padat. Gambar kromosom ikan nila
2. Metode tidak langsung, melalui teknik kultur darah.
Jika kita ingin menggunakan teknik jaringan padat, maka terdapat protokol sederhana yang dapat diterapkan yaitu :
- Sumber jaringan/sel........................ada pembelahan
- Perlakuan kolkisin...........................stop pembelahan
- Perlakuan hipotonik.........................penyebaran baik
- Fiksasi..........................................mempertahankan kondisi
- Teknik preparat..............................visualisasi
- Pewarnaan....................................memudahkan observasi
- Observasi......................................perbesaran 400x, 1000x
Yang harus diperhatikan ketika membuat preparat adalah
· Perendaman kolkisin sebaiknya antara 6-9 jam,
· Larutan KCl dan Carnoy haruslah dalam kondisi fresh atau baru,
· Ketika pembuatan ring, hindari adanya gelembung udara karena akan menyulitkan ketika pengamatan kromosom,
· Suhu hot plate jangan terlalu panas (± 45-50 oC), jika terlalu panas maka preparat akan gosong,
· Ketika pewarnaan dengan larutan giemsa, jangan terlalu banyak larutan yang diteteskan atau perendaman jangan terlalu lama karena akan menyebabkan warna ring terlalu tebal dan menyulitkan pengamatan,
· Sebaiknya tambahkan minyak emersi pada kaca preparat ketika akan diamati, hal tersebut dilakukan agar tidak terjadi bias pada proses pengamatan.
0 comments:
Post a Comment